Simmon’s Citrate Agar                                                                           .

MS – 2902

يك محيط كشت افتراقي است كه براي جداسازي  باكتريهاي گروه Enterobacteriaceae  و ساير ارگانيسمهائي كه توانائي تجزيه سيترات را دارند توسط (Simmons)  در سال 1926 توصيه گرديد.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Dipotassium phosphate………………..…….1

Ammonium dihydrogen phosphate…….…..1

Sodium chloride……………………….……..5

Magnesium sulfate….……………………..0.2

Bromothymol blue ……………………….0.08

Sodium citrate ………….……………………2

Agar ……………………………………….…15

pH : 7.0 ± 0.2 (at 25°C)

دستورالعمل :

5/24 گرم از محيط را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد تا كاملا حل گـردد سپس آنـــرا در  دماي   ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد .   توجه : محيط  فقط بصورت اسلنت استفاده شود.

سيمون سيترات آگار

محيطي افتراقي است كه با در نظر گرفتن توانائي باكتريهاي ميله اي شكل گرم منفي در مصرف سيترات سديم به عنوان تنها منبع كربن تهيه شده است . آنزيمي كه واكنش شكسته شدن سيترات را به عهده دارد به نامــهاي گوناگون Citrate aldolas , Citritase  و يا Citrate-lyas  خوانده ميشود . نخستين فرآورده هاي حاصل از شكسته شدن سيترات ؛  اگزالواستات و استات ميباشد كه در نهايت به پيروات و انيدريد كربنيك تبديل ميگردند بنابراين به نظر ميرسد كه قليائي شدن محيط به علت توليد بيش از حد انيدريد كربنيك و تركيب آن با سديم و آب ميباشد كه ايجاد كربنات سديم نموده و باعث تغيير رنگ معرف بروموتيمول بلو از سبز به آبي تيره ميگردد . آزمايش سيمون سيترات را بيشتر براي تشخيص E.coli  (سيترات منفي) از En.aerogenes (سيترات مثبت) انجام ميدهند .براي انكوبه كردن ؛ محيط كشت داده شده را به مدت 24 تا 48 ساعت در C ° 37  نگهداري نمائيد.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم  و در حرارت C °15 تا C  °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي  C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: سبز مایل به زرد،خشک ویکدست

قدرت ژلاتینی: جامد، با 1.5% آگار

رنگ و شفافیت: سبز و شفاف

عامل كشت داده شده  نتيجه رشد   سيترات   تغيير رنگ

1           +           +     آبی

2           –            –       سبز

1-Enterobacter aerogenes  ATCC 13048

2-Escherichia coli ATCC 25922