Brucella Agar (Base)                                                                                   .

MB – 1202

يك محيـــــــــــط كشت  پايه  ميبـاشد  كه   توســـــط (Jones & Brinley Morgan) در سال 1958 براي جداسازي و كشت گونه هاي بروسلا مورد استفاده قرار گرفت.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Peptone ………….……….………….……17.5

Yeast extract…………………………..………1

Dextrose………………………………..……10

Sodium chloride…………………………..…..5

Agar……………………………………….….15

pH : 7.2 ± 0.2 (at 25°C)

دستورالعمل :

5/ 48 گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد  تا كاملا حل گـردد . سپس آنرا در دماي   ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد. پس از آنكه دماي محيط به ° C50 رسيد 5% سرم اسب غير فعال را به آن اضافه نمائيد.( براي غير فعال كردن سرم اسب بايد آنـــــــرا  به مدت 30 دقيقه در دماي ° C56 انكوبه كرد.) در صورت نياز آنتي بيوتيك اضافه نمائيد.

بروسلا آگار (پايه)

يك محيط كشت پايه ميباشد كه با اضافه كردن 5% سرم خون اسب يا گوسفند به سرم دكستروز آگار تبديل ميگردد. با اضافه نمودن تركيب آنتي بيوتيكي : 100 ميلي گرم Cyclohexamide  + 25000 واحد Bacitracin  + 6000 واحد Polymixine B  به يك ليتر از اين محيط ميتوان محيط انتخابي بروسلا آگار را تهيه نمود. پليت هاي كشت داده شده را بايد در محيطي با 20-10% گاز Co2  و در دماي C °  35  به مدت 10 روز انكوبه نمود. كلني بروسلا ريز ؛ صاف و شفاف ميباشد و قطر آن پس از چند روز  از  mm 1  به mm 3-2  افزايش ميابد. براي تعيين حساسيت بروسلاها به رنگ ميتوان از محيط سرم دكستروز آگار استفاده نمود. براي افتراق گونه هاي مختلف بروسلامي توان از رنگهاي سيتونين و يا فوشين استفاده نمود.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تاC °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: زرد کمرنگ خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: جامد،با1.5% آگار

رنگ و شفافیت: زرد و شفاف

                                       عامل کشت داده شده               نتيجه رشد

1            +

2                           –

3                           –

1-Brucella species

2-Escherichia coli  ATCC 25922

3-Staphylococcus aureus ATCC 25923