محیط کشت Mueller Hinton Agar

Mueller – Hinton Agar
MM – 2301

اين محيط توسط (Mueller & Hinton)  در سال 1914 براي شناسائي و جداسازي  Neisseria  پيشنهاد گرديد.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Meat infusion…………………………….……2

Casein …………………………..…….……17.5

Starch…………………………….…..………1.5

Agar.……………………………………………18

pH : 7.3 ± 0.2 (at 25ᵒC)

دستورالعمل :

39  گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد تا كاملا حل گـردد سپس آنرا در دماي   ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد.

مولر_هينتون آگار

از اين محيط براي بررسي حساسيت ميكروارگانيسمها به داروهاي ضد ميكروبي استفاده ميشود هر چند كه در ابتدا از اين محيط براي جداسازي گونه هاي  Neissria  استفاده ميكردند . با استفاده از ديسكهاي آنتي بيوگرام 24 ساعت بعد از قرار گرفتن آنان بر روي محيط كشت داده شده ؛ پي به نوع عامل ممانعت كننده رشد ميبريم . در اين روش عوامل زير در تشخيص درست نقش دارند :

• غلظت ميكروارگانيسم تلقيح شده
• غلظت ديسكهاي آنتي بيوتيك
• زمان تهيه و ضخامت محيط
• روش انجام آزمايش
• مقياسي كه براي تفسير نتايج بكار ميبريم

در صورت اضافه نمودن 5 %  سرم خون اسب يا گوسفند به محيط امكان رشد باكتريهاي سخت رشد را فراهم خواهيم كرد . بايد توجه داشت كه ضخامت محيط در قسمتهاي مختلف پليت بايد يكسان  و در حدود 4 ميلي متر باشد . معمولا در پليتهاي 90 ميلي متري بايد ميزان 25 ميلي ليتر و در پليتهاي 140 ميلي متري حدود 60 ميلي ليتر محيط ريخته شود.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از  نور مستقيم و در حرارت      C °15 تا C °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: زرد کمرنگ،ٌخشک و یکدست

 قدرت زلاتینی: جامد، با 1.5% آگار

 رنگ و شفافیت: زرد کمرنگ و شفاف

عامل كشت داده شده                                              نتيجه رشد

      1                                                                         +

      2                                                                         +

      3                                                                         +

      4                                                                         +

      5                                                                         +

1-Escherichia coli  ATCC 25922

2-Pseudomonas aeruginosa  ATCC 27853

3-Staphylococcus aureus  ATCC 25923

4-Enterococcus faecalis  ATCC 29212

5-Neisseria meningitidis  ATCC 19615