PPLO Agar (Base)/Broth (Base)  or Mycoplasma                         .                                                                              

MP – 2606/MP ­2607

این محيط كشت علاوه برغنی سازی ،برای جداسازی و کشت مایکوپلاسما استفاده می شود مانند ارگانیسم های pleuropneumonia.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

PPLO                          MP-2606            MP-2607

Tryptone …………………10…………….. 10

Heart extract …………..…6……………..…6

Sodium chloride………….5………………..5

Agar………………………15………………._

pH : 7.8± 0.2 (at 25°C)

دستورالعمل :

36 گرم از پودرMP-2606 و 21 گرم از پودر MP-2607 را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا حرارت دهید تا كاملا حل گـردد سپس در دماي       ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد.  پس از  آنكه  دماي  محيط  به  C ° 45   رسانده و در شرایط اسپتیک 1% سرم اسب و ساپلیمنت غنی مایکوپلاسما را اضافه نمایید. قبل از توزیع محیط را بخوبی مخلوط کنید.

پی پی ال اُ آگار/براث (پايه)

از این محیط برای جداسازی مایکوپلاسما در نمونه های کلینیکی مانند خلط و کشت های میکس استفاده می شود.براي کشت مایکوپلاسما در این محیط باید مواد متشکله و همه ساپلیمنت ها عاری از هر گونه مواد سمی حتی در مقادیر کم باشند. بیشتر مایکوپلاسماها به سرم برای خوب رشد کردن نیاز دارندو همچنین حضور انتی بیوتیک برای جلوگیری از رشد،ارگانیسم های آلوده لازم است. پتاسیم تلوریت از رشد باکتری های گرم مثبت جلوگیری می کند.

اغلب مایکوپلاسما ها هوازی و بی هوازی اختیاری و بعضی میکروائروفیل می باشند. تعداد کمی از مایکوپلاسماهای بی هوازی ساپروفیت هستند که در دمای    C °  35  -22 رشد بهتری دارند در صورتیکه گونه های بیماری زا در دمای C °  35 رشد می کنند وقتی در محیط آگار دار رشد میکنند  مرفولوژی مشخصی نشان می دهند. محيط كشت داده شده را، به مدت 48 ســـــــاعت در دماي C ° 35 و در اتمسفر حاوی 5-10% اکسیژن قرار دهيد محیط را در صورت منفی بودن باید به مدت 3 هفته در انکوبه نگهدارید.

در صورت اضافه کردن کریستال ویولت به محیط از رشد باکتری های گرم منفی ممانعت می شود.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تاC °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: زرد کمرنگ،خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: جامد، با 1.5% آگار MP-2606 و مایع MP-2607

رنگ و شفافیت: زرد کمرنگ و شفاف

عامل كشت داده شده  نتيجه رشد  کرستال ویولت

1              +          +

2              +          +

3              +          –

1-Mycoplasma bovis  ATCC 25523

2-Mycoplasma pneumoniae  ATCC 15531

3-Streptococcus pneumoniae ATCC 6303