Urea Agar (Base)                                                                                   .

MU – 3101

اين محيط توسط (Christensen)  در سال  1946 براي  تشخيص و جداسازي باكتريهاي  تولید کننده اوره آز پيشنهاد گرديد.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Peptone ……………………………….…..….1

Glucose……………………..………..……..…1

Disodium phosphate………………….……1.2

Potassium dihydrogen phosphate……….0.8

Sodium chloride………..……………..………5

Phenol red………………………..…..….0.012

Agar……………………………..……………15

pH : 6.8 ± 0.2 (at 25ᵒC)

دستورالعمل :

4/2 گرم از پودر را به 95 ميلي ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد  تا كاملا حل گـردد .  سپس در دماي   ° C115 و فشار 10 پوند به مدت 20 دقيقه اتوكلاو نمائيد. پس از آن دماي محيط را به C ° 50 برسانيد و 5 ميلي ليتر اوره 40% را به صورت آسپتيك به آن اضافه نمائيد و بخوبي آنرا تكان دهيد سپس در شرايط استريل 10 ميلي ليتر از محيط را در لوله ها ريخته و به صورت اسلنت استفاده نمائيد.

اوره آگار (پايه)

محيطي افتراقي است كه معمولا براي شناسائي باكتريهاي جنس Proteus و تشخيص سريع آنزيم اوره آز مورد استفاده قرار ميگيرد . همچنين از اين محيط براي تشخيص هيدروليز اوره توسط ساير آنتروباكترياسه ها نيز استفاده ميشود با اين شرط كه زمان انكوباسيون بيشتر از 48 تا 24 ساعت باشد.آنزيم اوره آز توليدي بر اوره افزوده شده اثر مينمايد و آنرا به آمونياك ؛ انيدريد كربنيك و آب تبديل ميكند.آمونياك توليد شده سبب قليائي شدن محيط و تغيير رنگ معرف فنل رد موجود به رنگ صورتی – قرمز ميشود. در محيط اوره آگار اثر آنزيم اوره آز كند است بنابراين لازم است مقدار باكتري مورد آزمايش نسبتأ زياد و ميزان محيط كشت موجود در لوله كم باشد تا واكنش سريعتر حاصل گردد . معمولا زمان بررسي محيط كشت داده شده برای اوره مثبت ها –پرتئوس،3 تا 5 ساعت پس از كشت ميباشد. جهت انكوبه كردن ؛ محيط كشت داده شده را به مدت 5 تا 48 ســـــــاعت در دماي   C °  37 قرار دهيد.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تاC °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: نارنجی،خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: جامد،با 1.5% آگار

رنگ و شفافیت: نارنجی مایل به زرد و شفاف

عامل كشت داده شده     نتيجه رشد      اوره آز

1                 +            -/زرد

2                 +             +/صورتی

1-Escherichia coli  ATCC 25922

2-Proteus vulgaris  ATCC 13315