محیط کشت Hektoen Enteric Agar

Hektoen Enteric Agar.

MH – 1801

يك محيط اختصاصي – افتـــراقي اســـت كه توسط (King & Metzger)  در سال  1968 براي  تشخيص و جداسازي گونه هاي    Salmonella و   Shigella از نمونه هاي كلينيكي پيشنهاد  گرديد.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Proteose peptone ………………………… 12

Yeast extract………………………..…….….3

Lactose  ……………………………….……12

Sucrose ……………………..…………….…12

Salicin …………………………………………2

Bile salt ……………………………………….9

Sodium chloride………..……………..………5

Sodium thiosulphate…………..….…….……5

Ferric ammonium citrate ………….…….. 1.5

Acid fuchisn……………………………..….0.1

Bromo thymol blue ……………………. 0.065

Agar……………………………………………15 pH : 7.5 ± 0.2 (at 25°C)

دستورالعمل :

67/76 گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد  تا كاملا حل گـردد . محيط را اتوكلاو ننمائيد.

هكتون انتريك آگار

يك محيط مناسب براي جداسازي سالمونلا و شيگلا ميباشد . در اين محيط 3 قند لاكتوز ؛ سوكروز و ساليسين وجود دارد كه حالت اپتيمم را براي جداسازي پاتوژنهاي روده اي فراهم مي آورد . ميزان قندها و پپتون موجود در محيط باعث جلوگيري از اثر ممانعت كننده نمك صفراوي ميشود و معرفهاي موجود در محيط رشد خوب سالمونلا و شيگلا را سبب ميگردند . غلظت زياد لاكتوز باعث مشاهده بهتر پاتوژنهاي روده اي ميشود و مشكل تاخير تخمير لاكتوز را به حداقل ميرساند . به دليل تركيب تيوسولفات سديم و فريك آمونيوم سيترات ؛ باكتريهاي توليد كننده گاز H2S  توليد كلني هائي با مركز تيره مينمايند . با اضافه كردن 15 ميلي گرم در ليتر Novobiocin  از رشد باكتريهاي Citrobacter  و Proteus  جلوگيري ميگردد و محيط اختصاصي تر ميشود. جهت انكوبه كردن ؛ محيط كشت داده شده را به مدت 24 تا 48 ســـــــاعت در دماي C °  37 قرار دهيد.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تا C °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: سبز کمرنگ خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: جامد، با 1.5% آگار

رنگ و شفافیت: سبز و شفاف

عامل كشت داده شده    نتيجه رشد      رنگ كلني

1                +              آبي متمايل به سبز،با مرکز سیاه

2                              +                 آبي متمايل به سبز

     3                                –                         –

1-Salmonella typhimurium  ATCC 14028

2-Shigella flexneri ATCC 12022

3–Enterococcus faecalis ATCC 29212