OF Medium                                                                        .

MO – 2501

این محیط در سال 1953 توسط(Hugh & Leifson)  برای جداسازی ارگانیسم های گرم منفی بر اساس متابولیسم اکسیداسیون و احیا کربوهیدرات ها پیشنهاد گردید.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Tryeptone ……………………….…….……..2

Sodium Chloride…………………..………….5

Dipotassium phosphate…………………..0.3

Bromo thymol blue………………………0.08

Agar…………………………………………..2

pH : 6.8 ± 0.2 (at 25ᵒC)

دستورالعمل :

4/9 گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانید تا کاملا حل گردد و سپس هر 100 میلی لیتراز محیط را در لوله ها توزیع کرده و آن را در  دماي  °C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد. سپس به لوله های حاوی 100 میلی لیتر محیط، ابتدا 10 میلی لیتر محلول استریل شده گلوکز 10%، سپس 10 میلی لیتر محلول استریل لاکتوز10%،و نهایتا 10 میلی لیتر  محلول استریل شده ساکاروز 10% اضافه نمایید و آن را بخوبی حل کنید.5 میلی لیتر از محیط حاصله را تهیه کرده و در ظرف استریل قرار دهید و در شرایط هوازی و بی هوازی متابولیسم تخمیر را بررسی نمایید.

ا. اف مدیوم

ازاین محيط برای بررسی نحوه استفاده باکتری های گرم منفی روده ای از کربوهیدرات ها، استفاده می شود. جهت انجام آزمایش از 2 لوله حاوی محیط به همراه قند اضافه شده مورد نظر در شرایط هوازی و بی هوازی (جهت بی هوازی کردن لوله حاوی محیط از روغن معدنی استریل و یا پارافین استریل استفاده می شود) استفاده می نماییم.نتایج نشان می دهد که باکتری های احیا کننده،اسید را در هر لوله هوازی و بی هوازی تولید می کنند و رنگ محیط را تغییر می دهد ولی باکتری های اکسید کننده فقط در لوله هوازی تولید اسید می کند. در محیط بی هوازی میزان رشد باکتری ها بسیار کم و در نتیجه اسید تولید شده نیز بسیار کم می باشد بطوری که رنگ محیط تغییر نمی کند. باکتری هایی که بعنوان احیا کننده و اکسید کننده طبقه بندی نمی شوند در محیط بی هوازی هیچ واکنشی نداشته ولی در محیط هوازی تولید قلیا می کنند.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تاC °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: زرد کمرنگ مایل به سبز،خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: نیمه جامد،با 0.2% آگار

رنگ و شفافیت: سبز و شفاف

سوش          محیط پایه           محیط با دکستروز

         هوازی     بی هوازی    هوازی     بی هوازی 

1     K      K           AG        AG

2         K      K             A        K

3     K      K           AG       AG

4     K      K                    A     A

K: بازی سبز   A: اسیدی زرد   G: گاز

1-Escherichia coli  ATCC 25922

2-Pseudomonas aeruginosa  ATCC 9027

3-Salmonella enteritidis  ATCC 13076

4-Shigella flexneri ATCC 1202