محیط کشت Columbia Blood Agar (Base)

Columbia Blood Agar

MC – 1302

اين محيط توسط (Ellner)  در سال 1966 براي رشد و جدا سازي  ارگانيسمهاي سخت رشد پيشنهاد  گرديد.

 مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Peptone …………………..……….…….23

Starch ………………………………………1

Sodium chloride…………………………5

Agar ………………………………….……15

pH : 7.3 ± 0.2 (at 25°C)

 دستورالعمل :

44  گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد تا كاملا حل گـردد سپس در دماي   ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد. پس از آنكه دماي محيط به C ° 50  رسيد 5% خون گوسفند یا اسب دفيبرينه به آن اضافه نمائيد.

كلمبيا بلاد آگار

يك محيط بسيار مغذي است و از آن ميتوان محيط بلاد آگار و Chacolate Agar  تهيه نمود . از اين محيط انواع محيطهاي افتراقي و انتخابي نيز ميتوان        تهيه نمود . در صورت اضافه نمودن 1 ويال از مكمل هاي (Supplement) بروسلا ؛ كمپيلوباكتر و گاردنلا به 500 سي سي از اين محيط ميتوان محيط هاي انتخابي آنان را تهيه نمود . بخاطر وجود ماده مغذي زياد در اين محيط باكتريها به مقدار زيادي در اين محيط رشد ميكنند . در اين محيط كلني ها بصورت تيپيك رشد ميكنند و رنگ كلني هاي رشد كرده بخوبي قابل بررسي است .نشاسته موجود در اين محيط باعت خنثي سازي اثر سم هاي توليد شده ميگردد و رشد سريع باكتري را نيز سبب ميگردد . بخاطر  كربوهيدرات موجود در محيط ممكن است استافيلوكوك توليد هموليز آلفا نمايد كه در اين صورت براي تائيد گونه هاي باكتري بايد از تستهاي بيوشيميائي استفاده نمود.    براي انكوبه كردن ؛ محيط كشت داده شده را به مدت 24 تا 48 ســـاعت در دماي  C °   37 قرار دهيد.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تا C °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

 ظاهر پودر: زرد کمرنگ خشک و یکدست

 قدرت ژلاتینی: جامد،با 1.5% آگار

 رنگ و شفافیت: زرد کمرنگ و شفاف

عامل کشت داده شده     نتیجه رشد      همولیز

1                  +                  –

2                  +                بتا

3                 +                آلفا

1-Escherichia coli  ATCC 25922

2-Staphylococcus aureus  ATCC 25923

3-Streptococcus pneumoniae ATCC 6303