KIA (Kligler Iron Agar) .
MK – 2101
اين محيط توسط (Kligler) در سال 1917 براي تشخيص باكتريهاي گرم منفي روده اي كه قادر به تخمير گلوكز و لاكتوز، تولیدH2S هستند ؛ پيشنهاد گرديد.
مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):
Peptone ……………………………….…….20
Meat extract…..…………………..…………..3
Dextrose …………………………..…..…..…1
Lactose……………………………………….10
Sodium chloride………..……………..………5
Ferric citrate…………………..…………….0.5
Sodium thiosulphate…………….…….… 0. 5
Phenol red…………………………..…….0.05
Agar……………………………..……………15
pH : 7.4 ± 0.2 (at 25°C)
دستورالعمل :
5/55 گرم از پودر را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آنرا بجوشانيد تا كاملا حل گـردد . سپس در دماي ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد.
كليگلر آيرون آگار
اولين بار از اين محيط براي تشخيص باكتريهاي گرم منفي روده اي استفاده شد.لاكتوز و دکستروز، كه تخمير اين دو قند باعث افتراق بین گونه ها می شود ناشی از تغییر رنگ فنل رد (اندیکاتورpH) می باشد.فروس سولفات و سدیم تیوسولفات تولید H2Sسریع می کند که بصورت رسوب سیاه رنگ در سراسر Butt لوله دیده می شود.در اين محيط ميتوان توليد گاز را توسط باكتريها با شکافتن و جابجایی آگار تشخیص داد. براي كشت باكتريهاي مورد آزمايش بايد از دو قسمت شيب دار لوله (بصورت زيگزاگ) و استوانه اي لوله (بصورت عمقي) استفاده نمود . در صورت تخمير هر دو قند pH محيط اسيدي و معرف فنل رد به رنگ زرد تبديل ميگردد و اگر باكتري فقط قادر به تخمير دکستروز باشد بعد از گذشت 3 ساعت قسمت شيب دار و استوانه اي زرد رنگ ميگردد ولي به علت مقدار كم دکستروز ( 1/0 دکستروز) و عدم توانائي در تخمير لاكتوز ؛ باكتري جهت ادامه حيات شروع به استفاده از پپتون مينمايد و محيط را مجددأ قليائي كرده و رنگ آن قرمز ميگردد . جهت انكوبه كردن ؛ محيط كشت داده شده را به مدت 24 تا 48 ســـــــاعت در دماي C ° 37 قرار دهيد.
شرايط نگهداري:
در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت °C15 تاC °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي °C8-2 نگهداري نمائيد.
كنترل كيفي :
ظاهر پودر: نارنجی کمرنگ خشک و یکدست
قدرت ژلاتینی: جامد، با 1.5% آگار
رنگ و شفافیت: قرمز و شفاف
عامل كشت داده شده نتيجه رشد Butt Slant H2S Gas
1 + + – زرد زرد
2 + – + قرمز زرد
3 + – + قرمز زرد
4 + – – قرمز قرمز
1-Escherichia coli ATCC 25922
2-Salmonella typhimurium ATCC 14028
3-Proteus mirabilis ATCC 14153
4-Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Reviews
There are no reviews yet.