Luria Bertani Agar/Broth (Miller)                                    .                                                                                               

ML – 2202/ML­2203

این محیط برای کشت و نگهداری سویه های نوترکیب E.coliاستفاده می شود. از این محیط می توان در کشت های روزمره استفاده کرد بخصوص باکتری های سخت رشد.

مواد تشكيل دهنده (گرم در ليتر):

Luria Bertani                 ML-2202        ML-2203

Casein enzymic hydrolysate 10…………. 10

Yeast extract …………………5……………5

Sodium chloride…………..…10………..…10

Agar………………………..…15……………._

pH : 7.5 ± 0.2 (at 25°C)

دستورالعمل :

40 گرم از پودر ML-2202و 25 گرم از پودر ML-2203  را به 1 ليتر آب مقطر يا ديونيزه اضافه نمائيد و آن را حرارت دهید تا كاملا حل گـردد سپس در دماي       ° C121 و فشار 15 پوند به مدت 15 دقيقه اتوكلاو نمائيد.

لوریا برتانی(میلر)

این محیط برای کشت و نگهداری سویه های نوترکیب E.coli استفاده می شود. لوریا برتانی میلر کمی متفاوت می باشد به دلیل میزان دو برابر در سدیم کلراید.این محیط برای کشت خالص از سویه های نوترکیب، خیلی مغذی می باشد.

سویه هایی که از E.coli K12 مشتق شده اند دارای کمبود سنتز ویتامینB هستند و بیشتر به وسیله جهش های خواص ایجاد گونه های اگزوترف می کنند و در محیط هایی که مغذی نیستند  قادر به رشد نمی باشند.

Tryptone پپتیدها وپپتون را تامین میکند و ویتامینB به وسیله Yeast extract.سدیم کلراید باعث نقل و انتقال یون سدیم در دیواره و تعادل اسمزی را در محیط نگه می دارد.

محيط كشت داده شده را به مدت 18 تا24 ســـــــاعت در دماي C °35 قرار دهيد.

شرايط نگهداري :

در جاي خشك و دور از نور مستقيم و در حرارت C °15 تا C °25 نگهداري نمائيد. پس از استفاده درپوش را محكم ببنديد. محيط آماده را در دماي C ° 8-2 نگهداري نمائيد.

كنترل كيفي :

ظاهر پودر: زرد کمرنگ خشک و یکدست

قدرت ژلاتینی: جامد، با 1.5% آگار ML-2202و مایع ML-2203

رنگ و شفافیت: زرد کمرنگ و شفاف

عامل كشت داده شده                  نتيجه رشد

1                              +

2                              +

1-Escherichia coli  ATCC 25922

2-Escherichia coli  ATCC 23724